方案優(yōu)勢

方法檢出限為0.005～0.051mg/kg，回收率為89.1%～105.1%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.8%～4.1%，可以滿足飲料中鄰苯二甲酸酯的檢測要求。

采用標(biāo)準(zhǔn)

相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

方法/原理/步驟

　　材料與方法

　　1.材料與試劑

　　飲料市售。

　　標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、鄰苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、鄰苯二甲酸二戊酯(DPP-1)、鄰苯二甲酸二己酯(D H X P)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、鄰苯二甲酸二環(huán)己酯(DCHP)、鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二苯酯(DPP-2)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)，16種標(biāo)準(zhǔn)品均為Dr.Ehrenstorfer品牌，純度均大于99.5%。甲醇(HPLC級)、乙酸銨(GR)。

　　2.樣品處理

　　準(zhǔn)確稱取樣品5g(精確至0.01g)于25mL容量瓶中，加入約10mL甲醇，超聲波振蕩30min，平衡至室溫后用甲醇定容。用離心管離心后，取上清液待測。注意，本實驗所接觸的所有實驗器具均要求為玻璃材質(zhì)，并要求做全程溶劑空白實驗。

　　3.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

　　準(zhǔn)確稱取1.1節(jié)中所述16種標(biāo)準(zhǔn)品各10mg(精確至0.01mg)，用甲醇配成1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于4℃條件下密封保存。

　　將標(biāo)準(zhǔn)儲備液用甲醇稀釋成0.05、0.50、1.00、2.00、5.00mg/L的標(biāo)準(zhǔn)使用液，通過液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定，以多反應(yīng)監(jiān)測(multiple reaction monitoring，MRM)子離子峰面積對質(zhì)量濃度做標(biāo)準(zhǔn)定量曲線。

　　4.定性和定量

　　樣液經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定，通過保留時間及多反應(yīng)監(jiān)測MRM子離子相對豐度定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。

　　結(jié)果與分析

　　1.色譜和質(zhì)譜條件的優(yōu)化

　　1)色譜條件優(yōu)化

　　經(jīng)實驗可知，使用0.1%甲酸的甲醇溶液＋0.1%甲酸溶液體系，采用梯度洗脫的方式可以將16種鄰苯二甲酸酯較好的分離(梯度見表1)。

　　2)質(zhì)譜條件優(yōu)化

　　將16種PAEs標(biāo)準(zhǔn)使用液進(jìn)行質(zhì)譜全掃描，找到母離子，然后優(yōu)化傳輸電壓和碰撞能量，最后分6個時間段進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測，質(zhì)譜優(yōu)化條件參數(shù)見表2。本方法采用的分6個時間段進(jìn)行MRM多反應(yīng)監(jiān)測，能最大程度的提高儀器靈敏度和準(zhǔn)確度，從而實現(xiàn)16種PAEs的同時測定，優(yōu)于其他文獻(xiàn)報道。

　　2.標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍和檢出限

　　按1.3.4節(jié)的方法制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性方程和相關(guān)系數(shù)，結(jié)果表明在相應(yīng)的線性范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好(表3)。取經(jīng)預(yù)先測定不含PAEs的飲料，添加低濃度PAEs后，以3倍信噪比計算檢出限，10倍信噪比計算定量限，結(jié)果見表3。

　　3.回收率與精密度

　　為了驗證方法的準(zhǔn)確度和精密度，對飲料樣品進(jìn)行了高、中、低3個不同水平的標(biāo)準(zhǔn)添加回收實驗，每一水平分別做6份平行實驗，計算平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation，RSD)，以回收率表示準(zhǔn)確度，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示精密度。結(jié)果表明(表4)，回收率為89.1%～105.1%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.8%～4.1%，方法回收率和精密度良好，能滿足檢測的要求。經(jīng)實驗比對，本方法回收率、重復(fù)性等實驗結(jié)果均優(yōu)于同等條件的國標(biāo)氣質(zhì)聯(lián)用法。

　　4.樣品測定

　　隨機(jī)購買10批次的國產(chǎn)飲料，采用本實驗建立的方法進(jìn)行檢測。經(jīng)檢測，除有3批次飲料檢出0.33～0.89mg/kg的DEHP之外(低于GB 9685—2008《食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》最大遷移量要求，可能與包裝遷移有關(guān))，其他均低于方法檢出限，經(jīng)與GB/T 21911—2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》檢測結(jié)果對比，檢測結(jié)果一致。

　　每次進(jìn)樣完后，需長時間自動清洗進(jìn)樣針以降低殘留。實驗發(fā)現(xiàn)，采用50%的甲醇溶液自動清洗進(jìn)樣針5 s以上便能滿足要求。

儀器設(shè)備

　　儀器與設(shè)備

　　1290-6410B液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用美國Agilent公司；Direct-Q純水儀美國密理博公司。

　　色譜條件

　　色譜柱：Aglilent Eclipse plus C18(2.1mm×150mm，3.5μm)；流動相：0.1%甲酸的甲醇溶液＋0.1%甲酸溶液；柱溫：3 0℃；進(jìn)樣量：5μL。

　　質(zhì)譜條件

　　操作模式：ESI正離子模式；干燥氣流量：10L/min；干燥氣溫度：350℃；毛細(xì)管電壓：4000V；噴霧壓力：30psi。