方案優(yōu)勢

分析方法簡便，快速，經(jīng)濟(jì)，準(zhǔn)確。

采用標(biāo)準(zhǔn)

國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

方法/原理/步驟

　　1.對照品溶液的配制和測定

　　精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥36h的芍藥苷10.0mg，用甲醇定容成濃度為1.0mg/ml的對照品儲備液。取儲備液500μl于1ml量瓶中，加運(yùn)行緩沖液至刻度，進(jìn)樣測定.

　　2.供試品溶液的制備和測定

　　麻仁丸和除濕白帶丸取本品細(xì)粉1g，精密稱定，置50 ml量瓶中，加入甲醇至刻度，超聲處理(功率250 W，頻率18kHz)30min，濾過。濾液用運(yùn)行緩沖液稀釋至適當(dāng)濃度進(jìn)樣測定。

　　陰性對照溶液按處方比例及生產(chǎn)制備方法，制得無白芍的麻仁丸和除濕白帶丸空白樣品，按供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液，進(jìn)樣測定。結(jié)果表明，對照品峰與陰性溶液峰沒有重疊。

　　3.標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

　　分別取芍藥苷儲備液62.5，125，250，500，1000μl用超純水定容至lml，依次進(jìn)樣后，以藥物濃度(C)對峰面積與遷移時(shí)間之比值(X)進(jìn)行回歸。同歸方程為：C=-1.2765×0.01+2.7579×0.000001X；r=0.9995；線性范圍為0.0625～1.0mg/ml。

　　4.精密度試驗(yàn)

　　取濃度為0.25mg/ml的對照品溶液，日內(nèi)和日間重復(fù)進(jìn)樣5次，測定峰面積與遷移時(shí)間之比值，計(jì)算精密度.日內(nèi)RSD為1.61%；日間RSD為3.15%。

　　5.加樣回收率試驗(yàn)

　　在已知濃度的麻仁丸和除濕白帶丸樣品溶液中分別加入適當(dāng)芍藥苷對照品溶液進(jìn)樣分析，測定含量。

　　6.樣品含量測定

　　用本法對麻仁丸和除濕白帶丸樣品進(jìn)行含量測定。

儀器設(shè)備

　　儀器和試劑

　　Bio Focus 30o0型毛細(xì)管電泳儀(美國Bio-Rad公司)；融熔石英毛細(xì)管柱(未涂漬)50μm×50cm(有效分離長度45.5cm)；微孔濾(0.45μm,)及過濾裝置(Millipore，USA)；超純水器(Milll-Qplus，USA)；對照品芍藥苷由中國藥品生物制品檢定所提供；所用藥材由本院中藥房提供，經(jīng)重慶市中藥研究院鑒定；麻仁丸(水蜜丸)由太極集團(tuán)重慶桐君閣制藥廠生產(chǎn)，批號001121；除濕白帶丸(水蜜丸)由四川天府藥業(yè)公司生產(chǎn)，批號000806；甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純。

　　測定條件運(yùn)行緩沖液：50mmol/L硼砂緩沖液，用氫氧化鈉調(diào)pH為10.6；

　　操作電壓20kV，極性由正到負(fù)，檢測波長230nm，柱溫20℃；

　　采用壓力進(jìn)樣，壓力進(jìn)樣常數(shù)為10psi×S。

　　運(yùn)行緩沖液和樣品溶液均經(jīng)045μm微孔濾膜過濾后使用。

　　毛細(xì)管沖洗方法：每次開機(jī)用超純水沖洗3min，0.1mol/L氫氧化鈉3min，超純水3min，運(yùn)行緩沖液3min。

　　每次測定之間用運(yùn)行緩沖液沖洗1min。

討論

　　1.緩沖液條件對芍藥苷分離的影響實(shí)驗(yàn)中考察了pH8～11范圍的緩沖液，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，pH大于9.0時(shí)，芍藥苷能夠分離，且所得蜂形較好；當(dāng)pH小于9.0時(shí)，則芍藥苷峰形變壞且遷移時(shí)間延長。最后確定最佳pH為10.6，芍藥苷得以很好分離且峰形較好，遷移時(shí)間適中。對硼砂濃度在25～100mol/L的范圍內(nèi)進(jìn)行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著濃度的增加分離度增加，但同時(shí)電流增加造成基線不穩(wěn)，兼顧二者關(guān)系最后確定硼砂緩沖液濃度為50mmol/L。

　　2.定量準(zhǔn)確性從本實(shí)驗(yàn)的分析結(jié)果可以看出，HPCE對麻仁丸和除濕白帶丸樣品中芍藥苷的定量是準(zhǔn)確有效的。HPCE較HPLC具有高效、快速、進(jìn)樣體積小、溶劑消耗少和抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)中HPCE的理論板數(shù)可達(dá)到10萬以上，分離效率高于HPLC。由方法學(xué)考察結(jié)果可見.本法精密度高，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果無疑為麻仁丸和除濕白帶丸中芍藥苷的定量提供了一個(gè)新的途徑，也可為同類中成藥的質(zhì)量控制提供參考。