HPLC：

服務(wù)簡(jiǎn)介

高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography -- HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。

本臺(tái)高效液相色譜（HPLC）LC-20A在充實(shí)基本性能的同時(shí)，確立了高度對(duì)應(yīng)網(wǎng)絡(luò)要求的綜合管理系統(tǒng)，一元化管理數(shù)據(jù)與裝置，實(shí)現(xiàn)了分析的高效率

服務(wù)參數(shù)

本臺(tái)高效液相色譜輸液?jiǎn)卧?nbsp;Prominence 20AT，

輸液方式：串聯(lián)雙柱塞；

梯度系統(tǒng)，梯度方式：低壓混合 ，混合溶劑數(shù)：最多4液；

紫外可見檢測(cè)器 ，光源： D2燈；

自動(dòng)進(jìn)樣器 Prominence SIL-20A。

檢測(cè)項(xiàng)目

高效液相色譜（HPLC）用于有機(jī)物的定量。

樣品要求

可根據(jù)實(shí)際樣品提供具體的樣品前處理方案。

結(jié)果示例

1、乙二醇含量測(cè)試

2、18種氨基酸含量測(cè)試

常見問題及解答

1. 測(cè)試高效液相為什么需要先和測(cè)試經(jīng)理溝通？

HPLC可選因素太多，檢測(cè)器條件，色譜柱條件，流動(dòng)相條件都可以改變出峰時(shí)間。

2. 測(cè)試為什么需要標(biāo)準(zhǔn)品？

無(wú)論是定性還是定量都需要用標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)鑒別，作為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)衡量。

3. 沒有任何信息可以做HPLC嗎？

可以的，這就是涉及了方法開發(fā)，耗時(shí)會(huì)久一點(diǎn)。

LCMS：

服務(wù)簡(jiǎn)介

   Thermo ScientificTM Q ExactiveTM 高性能臺(tái)式四極桿—軌道阱LC-MS/MS系統(tǒng)，是首臺(tái)將四極桿的母離子選擇性和高分辨率精確質(zhì)量(HR/AM)OrbitrapTM 質(zhì)量分析相結(jié)合的商業(yè)化儀器，旨在提供高度可靠的定量和定性(quan/qual)工作流程。

   Q ExactiveTM 質(zhì)譜儀具有創(chuàng)新的HR/AM QuanfirmationTM 功能，能夠在單次分析中鑒定、定量和確認(rèn)復(fù)雜混合物中更多痕量級(jí)的代謝物、污染物、肽類和蛋白質(zhì)。與其它技術(shù)不同的是，該系統(tǒng)能夠在不影響MS/MS靈敏度、質(zhì)量分辨率或定量重現(xiàn)性的情況下，獲得極其可靠的分析結(jié)果。

   Q Exactive高性能臺(tái)式四極桿—軌道阱LC-MS/MS系統(tǒng)具有如下意義非凡的創(chuàng)新設(shè)計(jì)，大大擴(kuò)展了Thermo Scientific Exactive家族Orbitrap系統(tǒng)的功能：

　　· 集成式四極桿質(zhì)量過(guò)濾器實(shí)現(xiàn)前體離子選擇性。在Orbitrap HR/AM檢測(cè)之前，MS/MS碎裂過(guò)程發(fā)生在能量更高的碰撞誘導(dǎo)解離(HCD)池中;

　　· 新型C-Trap離子光學(xué)系統(tǒng)和HCD碰撞池提供了快速HCD MS/MS掃描并改善了低質(zhì)量數(shù)離子的傳遞，從而提高靈敏度和定量性能，尤其適用于使用同位素標(biāo)簽的實(shí)驗(yàn);

　　· 多重檢測(cè)提高了整體系統(tǒng)工作周期的效率，能夠更好的與UHPLC兼容，并在Orbitrap進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)之前收集并保存多種母離子。

 

服務(wù)參數(shù)

技術(shù)參數(shù)：

1. ESI/APCI源；

2. 分辨率：140,000 FWHM( m/z≤200)

3. 質(zhì)量范圍50-6000m/z

4.高分辨質(zhì)譜采集速率：最高12Hz

5. 超快速二元高壓泵

6. 二極管陣列檢測(cè)器

 

檢測(cè)項(xiàng)目

1．藥物分析和藥代動(dòng)力學(xué)研究；
2．環(huán)境污染物及其產(chǎn)物分析； 
3．天然產(chǎn)物分析； 
4．未知物結(jié)構(gòu)分析；

5.蛋白分子量測(cè)定。

樣品要求

液體1ml以上，固體5mg以上

常見問題及解答

LC-MS樣品如何預(yù)處理？

1. 樣品中不得含有強(qiáng)酸、強(qiáng)堿，如含有上述物質(zhì)，需進(jìn)行處理，以保證批pH值在2~7.5之間。樣品中不得含有硼氫化鈉，對(duì)于加入甲醇后會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)堿的體系(如有氫鈉)的樣品請(qǐng)務(wù)必在送樣前進(jìn)行處理。 2. 如果體系中含有大量的無(wú)機(jī)鹽，需要進(jìn)行處理，以防止無(wú)機(jī)鹽析出，堵塞分析柱。同時(shí)大量的無(wú)機(jī)鹽存在會(huì)污染質(zhì)譜離子源部分，甚至影響樣品的信號(hào)。 3. 如果反應(yīng)體系中使用了一些質(zhì)譜信號(hào)響應(yīng)十分強(qiáng)的物質(zhì)，如：三乙胺，四丁基溴化銨，三苯基氧磷等，送樣前請(qǐng)進(jìn)行處理，盡量減少此類物質(zhì)在樣品中的殘留，以避免造成目標(biāo)物質(zhì)質(zhì)譜信號(hào)的抑制。 4. 對(duì)于應(yīng)用了金屬類催化劑（如鈀類催化劑）的反應(yīng)體系時(shí)，請(qǐng)務(wù)必進(jìn)行處理后再送樣。這類金屬催化劑往往很容易在LCMS分析體系內(nèi)殘留，質(zhì)譜信號(hào)非常強(qiáng)，將嚴(yán)重影響后面樣品的正常測(cè)試。 5. 測(cè)試樣品中要盡量避免含有紫外吸收比較強(qiáng)的溶劑，如：苯，甲苯，吡啶等。 6. 對(duì)于監(jiān)控反應(yīng)的樣品（如反應(yīng)液或用乙酸乙酯，二氯，三氯萃取后的反應(yīng)液，過(guò)柱用烷烴溶劑等）取適量后用甲醇，乙腈等稀釋到適當(dāng)濃度。 7. 發(fā)貨或純度測(cè)定的樣品盡可能的用色譜級(jí)的甲醇，乙腈，水溶解；如果這些溶劑的溶解性不好，可用較好溶的溶劑先溶解后再用色譜甲醇，乙腈稀釋到合適的濃度；另外，有些發(fā)貨的樣品需要用220nm，可用DMSO或DMF溶樣（發(fā)貨樣品盡量避免含有乙酸乙酯，二氯等溶劑），然后再用色譜甲醇，乙腈稀釋到合適的濃度，因?yàn)檫@兩個(gè)溶劑的峰保留時(shí)間短，不會(huì)與樣品峰重疊。發(fā)貨樣品送固體的請(qǐng)注明所需溶劑。 8. 被測(cè)樣品或樣品中含有劇毒物質(zhì)或刺激性氣味，請(qǐng)注意，實(shí)驗(yàn)員務(wù)必要標(biāo)示清楚并告知分析員，以便采取防護(hù)措施。 9. 樣品必須經(jīng)過(guò)0.22um的過(guò)濾器過(guò)濾（過(guò)濾后樣品必須澄清，無(wú)絮狀物），否則不予測(cè)試。

送樣量及樣品處理有什么要求嗎？

1. 對(duì)于已經(jīng)純化的樣品，最好去除溶劑，用點(diǎn)樣毛細(xì)管沾取少量放入樣品管，并稀釋至0.5mL，用0.22μm的濾器過(guò)濾即可。 2. 對(duì)于反應(yīng)體系樣品，如果在薄層上點(diǎn)一下，斑點(diǎn)即很清晰，說(shuō)明濃度適中，取0.2mL放入樣品樣管，稀釋至0.5mL，用0.22μm的濾器過(guò)濾即可。 3. 如果需要點(diǎn)多次才能在薄層上見到，就需要酌情增加。 4. 樣品濃度特別小或特別大的請(qǐng)及時(shí)向分析員說(shuō)明。 反應(yīng)液需用2ml離心管，切忌使用其它離心管或樣品管。要選擇能完全溶解樣品的溶劑，稀釋處理后的樣品需要澄清。濃度過(guò)小或過(guò)大要備注說(shuō)明。

如何判斷樣品是不是可以做LCMS

可以查詢相關(guān)文獻(xiàn)，或者樣品相關(guān)的檢測(cè)信息，一般的化合物，代謝產(chǎn)物，降解產(chǎn)物都是可以測(cè)試的。

數(shù)據(jù)如何解析

我們實(shí)驗(yàn)室有專業(yè)的解析老師，需要解析可以跟項(xiàng)目經(jīng)理聯(lián)系，根據(jù)不同解析服務(wù)進(jìn)行報(bào)價(jià)。

LCMS可以進(jìn)行定量實(shí)驗(yàn)嗎 ？

可以的，需要標(biāo)準(zhǔn)品。LCMS定量比一般的檢測(cè)要靈敏。

服務(wù)案例

1.  300多種多酚含量組成測(cè)定

2. 18種單糖組成測(cè)試